亲子鉴定，是指运用生物学、遗传学以及有关学科的理论和技术，根据遗传性状在子代和亲代之间的遗传规律，判断被控的父母和子女之间是否亲生关系的鉴定。
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人类的遗传物质本来就只有DNA而不是rna所以做亲子鉴定只能是取人体细胞的DNA来做鉴定不可能是会得到rna因为Rna是一部分病毒的遗传物质人类只有DNA这是人类细胞的典型的结构
所以Rna亲子鉴定这根本是不存在的说法做亲子鉴定是只能取双方的血液或者其他的成分来做DNA检查而不是rna
快速鉴定RNA和DNA的方法是什么?
它们的基本原理是什么?
优质解答DNA和RNA的鉴别,较常用的方法是利用两类核酸中不同的戊糖各自具备的不同的颜色反应,而得以定性鉴别其中鉴定DNA的方法称为二苯胺法,鉴定RNA的方法称为地衣酚（苔黑酚,3,5-二羟基甲苯）法上述颜色反应不但可用于两类核酸的定性鉴定,也是定糖法定量测定核酸的依据
分子生物学实验更大的特点就是好上手难做好进行DNARNA相关的实验时细节显得尤为重要今天介绍3种鉴定RNA质量好坏的方法从源头开始把控实验
1 为什么要确定RNA的质量
与DNA不同RNA是极为脆弱的由于其单链结构RNA的碱基和氢键全都暴露在环境中极易被环境中的各种化学物质和RNA酶降解一旦降解后期的实验纯属浪费时间了然而这一过程往往是不易察觉
良好的实验环境和准确的实验流程控制是保证实验成功的基本条件外源性酶是影响实验的重要因素RNA实验需要我们在实验流程中不断自查是否存在问题而RNA质量检测就是重要的一环如果RNA质量存在问题后期的实验结果会惨不忍睹什么样的都有闲话不多说下面就介绍3种评价RNA质量方法
吸光度法测RNA总量
即紫外分光光度计检测经常使用
280320230260nm下的吸光度分别代表了核酸溶液浑浊度盐浓度和蛋白等有机物的值我们只看OD260/OD280理论上纯RNA情况下的OD260/OD280的值为2可接受的范围为1.8-2.0纯的DNA情况下的OD260/OD280的值为1.8可接受的范围是1.6-1.8
个人推荐的办法是严格采用阈值1.8-2.0作为判定标准不符合的RNA样品丢弃重新提取这样才能更小化误差
电泳法谱测RNA完整性
一般而言RNA琼脂糖实验是为了检测RNA的完整性但是我们也可以从中看出RNA的质量好坏
我们的目的并不是要检测RNA的分子量RNA无需变性所以采用普通的1%含EB琼脂糖凝胶含EB即可满足要求跑胶结束后在紫外灯的照射下条带从上到下分别为28S18S5S这是真核生物的特征28S和18S 条带更明亮清晰条带边缘锐利更重要的是28S条带的亮度大概是18S条带的两倍或者以上这种情况RNA的质量是很好的如果需要更细致一点可能采用Image J测量一下条带的灰度值其测量方法和蛋白一样
保温法RNA是否酶污染
上面2种方法都是采用物理的方法进行检测但是我们无法得知所抽提的RNA是否有RNA酶污染很多人没有注意这一点认为使用了无RNA酶实验器材哪里还有RNA酶啊事实就是这么悲惨甚至认为这是相关试验失败的重要原因毕竟很少有人会意识并且验证这一点
RNA酶比较顽强单纯加温也很难灭活必须使用DEPC实验室环境中其实存在很多RNA酶这些酶大多来源于人的呼吸和唾沫你可以保证自己带口罩实验但是你可能很难要求同处一室的其他人都带上口罩很多高质量的实验室会开通PCR专用实验间他们的实验往往比较顺利
RNA保温实验原理:
很简单就是取一点样品人为的升温并保持一段时间接着通过琼脂糖跑胶的操作如果存在RNA酶那么RNA条带的28S和18S肯定模糊不清而5S会发亮并且条带拖尾现象严重
网上有一份RNA保温试验方法还是比较好的贴上来给大家看看:
从RNA溶液中吸取两份1000ng的RNA加入至0.5ml 的离心管中并且用pH7.0的Tris缓冲液补充到10ul的总体积然后密闭管盖把其中一份放入70℃的恒温水浴中保温1h另一份放置在-20℃冰箱中保存1h时间到了之后取出两份样本进行电泳电泳完成后比较两者的电泳条带如果两者的条带一致或者无明显差别则说明RNA溶液中没有残留的RNA酶污染RNA的质量很好相反的如果70℃保温的样本有明显的降解则说明RNA溶液中有RNA酶污染
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